抗原通常是由多個抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機體，由一個B淋巴細胞接受該抗原刺激所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（MonoclonalAntibody）。由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一種抗原決定簇，也可刺激機體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體�？乖碳C體，產(chǎn)生免疫學反應，由機體的漿細胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。
抗原準備
可以作為抗原的物質(zhì)有很多種，一般的科研實驗中，經(jīng)常使用的抗原有：偶聯(lián)多肽、偶聯(lián)的小分子或化合物、天然或重組蛋白等等。
對可溶性抗原而言，為了增強其免疫原性或改變免疫反應的類型、節(jié)約抗原等目的，常采用加佐劑的方法以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫應答。
佐劑應用
1．佐劑的類型 目前實踐中常應用的佐劑有氫氧化鋁膠、明礬、弗氏佐劑、脂質(zhì)體和石蠟
油等。也有采用結(jié)合桿菌等分枝桿菌、白喉桿菌以及細小棒狀桿菌等。
⑴ 弗氏不完全佐劑（incomplete Freund's adjuvant,IFA）
⑵ 弗氏完全佐劑（complete Freund's adjuvant,CFA）
初次免疫時，最好用弗氏完全佐劑，以刺激機體產(chǎn)生較強的免疫反應。再次免疫時，一般不用完全佐劑，而采用弗氏不完全佐劑。但在研究分枝桿菌及相關(guān)抗原時，一般不用弗氏完全佐劑，以免卡介苗的干擾。
⑶ 脂質(zhì)體：是人工制備的類脂質(zhì)的小球體，由一個或多個酷似細胞膜的類脂雙分子層組成，這種結(jié)構(gòu)使其能夠攜帶各種親水的、疏水的和兩性物質(zhì)，他們被包裹在脂質(zhì)體內(nèi)部的水相中，或插入類脂雙分子層或吸附、聯(lián)接在脂質(zhì)體的表面，起到明顯的免疫增強作用。
⑷ 油佐劑 ：采用植物油和礦物油均可，包括豆油、花生油、油菜油等。目前應用最廣的礦物油。
乳化作用
將抗原與佐劑混合的過程稱為乳化。乳化的方法很多，可采用研缽乳化；可直接在旋渦振蕩器上乳化；可用組織搗碎器乳化。
乳化好的標志是取一滴乳化劑滴入水中呈現(xiàn)球形而不分散。
免疫動物
供免疫用的動物主要是哺乳動物和禽類，常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定，也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體，多采用大動物；如要是獲得直接標記診斷的抗體，則直接采用本動物；如要獲得間接的標記診斷用抗體，則必須用異源動物制備抗體；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少，則可以采用純系小鼠制備；一般實驗室采用的抗體，多用兔和羊制備。
抗體鑒定
抗體的效價鑒定 鑒定效價的方法很多，包括有試管凝集反應、瓊脂擴散試驗、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA)等。如制備抗抗體的效價，一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。
抗體的特異性鑒定 抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質(zhì)的識別能力�？贵w的特異性高，它的識別能力就強。衡量特異性通常以交叉反應率來表示。交叉反應率可用競爭抑制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時的濃度，并按下列公式計算交叉反應率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時，表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應率近似為 0，即該血清的特異性較好。
抗體的親和力 是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在 108 ～1010 /mol，也有多達 1014 /mol�？贵w親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗證抗體的均一性等均有重要意義。
抗血清凍存
抗血清收獲后，加 1/萬硫柳汞或 1/萬的疊氮鈉防腐，或加入等量的中性甘油，分裝小瓶，置-20℃以下的低溫保存，數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價無明顯變化。注意避免反復凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。